目的 对伯氏疏螺旋体（又称莱姆病螺旋体， Borrelia burgdorferi）外膜蛋白OspC和鞭毛蛋白FlaB原核表达后，制备多克隆抗体并进一步进行免疫原性检测。 方法 以伯氏疏螺旋体BgNMJW1基因组DNA为模板，PCR扩增出外膜蛋白OspC和鞭毛蛋白FlaB的基因片段，克隆入表达载体pGEX-6p-1，转入表达菌株Rosetta，经异丙基硫代半乳糖苷（IPTG）诱导产生融合蛋白，并经谷胱甘肽转移酶柱蛋白纯化或割胶纯化。纯化后的蛋白用于免疫新西兰大白兔得到多克隆抗血清。 结果 经聚丙烯酰氨凝胶电泳（SDS-PAGE）鉴定，经过诱导的携带目的基因载体，与对照相比，有明显的目的蛋白表达，大小分别约为49×10 ³和63×10 ³，诱导结果表明，在细菌培养至吸光度（ A）值为0.4时，加入1 mmol/L的IPTG，在25℃下，诱导10 h，此时产生的蛋白表达量较大。将融合表达产生的蛋白纯化后免疫新西兰大白兔得到多克隆抗血清，应用抗血清对 B.garinii和 B.burgdorferi 2种基因型的伯氏疏螺旋体代表菌株（BgNMJW1和BbB31A3）的OspC和FlaB进行蛋白免疫印迹检测，可得到清晰检测条带。 结论 OspC和FlaB的联合应用可对莱姆病的诊断起到有效作用。

目的 对浙江、福建省及上海市东南沿海地区汉坦病毒的基因进行比较。方法 收集浙江、福建省及上海市汉坦病毒部分M基因序列,应用Mega 4.0和DNAStar软件包进行系统发生分析,以邻位相连法(NJ)构建系统发生树,分析东南沿海地区浙江、福建省及上海市汉坦病毒的基因差异,分析采用1000个多序列组。结果 经对浙江、福建省及上海市若干株汉坦病毒基因的序列比较与系统进化分析,浙江省分离的同型别毒株的基因序列同源性高于福建省与上海市的分离毒株,而浙江省同地区分离株的核苷酸同源性更高,地区接近的分离株系统进化分支的分布也大部分更靠近。汉滩型病毒(HTNV)福建株的ZH53和汉城型病毒(SEOV)浙江建德株Gou3和ZJ5与本研究同型别的其他株及国际标准株的核苷酸同源性较低,分别为82.7%～86.3%和84.0%～85.3%,而且分别在HTNV和SEOV发生群中构成一独立分支。浙江省从田鼠中分离到SEOV,产生宿主“溢出”现象。结论 浙江、福建省及上海市东南沿海地区汉坦病毒的基因差异和亲缘远近关系主要表现在地区性,显示出高度的地理聚集现象,浙江省建德地区和福建省分别存在SEOV和HTNV的特殊亚型病毒。

目的 分析浙江省2013年肾综合征出血热(HFRS)疫情及宿主种群分布和带病毒情况,为制定下一步防控措施提供科学依据。方法 采用描述性流行病学方法分析HFRS疫情三间分布特征,在全省5个HFRS监测点采用夹夜法捕获鼠形动物,分别取其肺和血清,用免疫荧光法检测汉坦病毒抗原和抗体,分析浙江省鼠形动物种群分布及其带病毒情况。结果 2013年浙江省共报告HFRS病例527例,发病率为0.9622/10万,比2012年升高了3.89%,无死亡病例。病例主要集中在宁波、台州、绍兴、衢州、丽水等地区,全省除舟山市外各地级市均有病例报告;发病高峰时间主要集中在5-6月和12月前后;浙江省HFRS的高发人群为20～65岁年龄组,占发病总数的93.17%(491/527);全省5个监测点鼠密度监测中共布放有效鼠夹13 785夹次,捕鼠546只,平均鼠密度为3.96%;共检测鼠血清678份,阳性80份,阳性率为11.80%;共检测鼠肺669份,阳性44份,带病毒率为6.58%,5个监测点HFRS抗体阳性率差异有统计学意义(χ²=30.962,P<0.05);HFRS病原携带率差异亦有统计学意义(χ²=9.83,P<0.05)。结论 2013年浙江省HFRS疫情较2012年有上升趋势,宿主动物密度和带病毒率较高,需采取措施进行预防控制。

目的 分析浙江省肾综合征出血热(HFRS)疫区鼠形动物携带汉坦病毒状况及其型别。方法 应用直接免疫荧光试验和RT-PCR方法检测汉坦病毒抗原和核酸,阳性者用长爪沙鼠和Vero-E6细胞进行病毒分离,对分离株的M片段基因进行序列测定和分析。结果 2008－2011年在浙江省HFRS疫区捕获的鼠形动物中以黑线姬鼠为优势鼠种;从该鼠鼠肺中共分离到6株汉坦病毒,序列分析表明分离株均为汉滩型汉坦病毒,其中Z521、524、534为H7亚型,TT-27、T-43、R88可能为新亚型;6株分离株之间的基因同源性较高,并与以往浙江省分离株具有较高同源性。结论 2008－2011年浙江省HFRS疫区鼠间存在汉滩型汉坦病毒流行。

目的 研究苦皮藤素对白纹伊蚊幼虫的毒杀作用机制及对该蚊幼虫生长发育等各种因素的影响。方法 采用常规生物学法进行毒力测定及观察对蚊幼虫生长发育的影响， HE染色观察胃肠形态的改变，通过氧化铬的比色法测定拒食活性。结果 随苦皮藤素浓度的增大，其对白纹伊蚊4龄幼虫的毒杀作用力增强， LC₅₀为22.66（18.38～27.95）mg/L，LC₉₅为84.51（60.87～142.27）mg/L。苦皮藤素能降低白纹伊蚊幼虫的化蛹率，延长平均化蛹时间和平均羽化时间，但对羽化率的影响不明显。随苦皮藤素作用浓度的增大，拒食活性也增强。胃肠形态发生改变：刷状缘脱落，中肠细胞变性、崩解。结论 苦皮藤素能通过胃毒、拒食、触杀等作用方式毒杀白纹伊蚊幼虫，并能抑制其生长发育。

目的 初步评价应用自制辣根过氧化物酶（HRP）标记汉坦病毒（HV）重组N蛋白（rNP）的rNP?IgM直接捕捉ELISA 诊断试剂盒。方法 考核该试剂盒的特异性和稳定性；比较其与同类商品试剂盒的临床检测结果，以评估检测血清抗HV?IgM的敏感性。结果 （1）该试剂盒仅与抗HV?IgM 阳性血清发生反应，而与抗水痘病毒-IgM（抗VZV?IgM）、抗流行性乙型脑炎病毒-IgM（抗JEV?IgM）、抗登革热病毒-IgM（抗DV?IgM）、抗手足口EV71病毒-IgM（抗EV71?IgM）阳性血清均无反应；试剂盒放置37 ℃ 3 d，检测血清抗HV?IgM 的活性，无明显降低。（2）在120例临床疑似肾综合征出血热的144份血清中，2种试剂盒仅对12例的12份血清抗HV?IgM检测结果不一致，其中8例的首份血清，该试剂盒阳性，商品试剂盒阴性（第2份血清2种试剂盒均阳性）；3例的首份血清（未采到第2份血清），该试剂盒为临界值，商品试剂盒阴性；另1例的首份血清该试剂盒阳性，商品试剂盒阴性（2种试剂盒第2份血清和第3份血清均阳性）。 结论 实验室研制的捕获法ELISA抗HV?IgM诊断试剂盒具有良好的特异性、稳定性和敏感性，适于HV感染的临床诊断和流行病学监测。

目的 对光活化α-三噻吩（α-T）引起的蚊幼虫脂质过氧化进行组织化学定位研究。方法 用冷Schiff组织化学法，检测光活化α-T处理后的白纹伊蚊幼虫，光学显微镜下与对照组比较，观察光活化α-T引起的脂质过氧化组织定位。结果 对照组组织均未着色，实验组中肠组织细胞、围食膜、马氏管刷状缘及管腔出现紫红色着色。结论 光活化α-T能使白纹伊蚊幼虫的组织发生脂质过氧化，且脂质过氧化的主要组织靶标为中肠和马氏管。

【摘要】 目的 了解浙江省鼠类自然感染汉坦病毒（HV）情况和病毒型别，为肾综合征出血热（HFRS）防治提供科学依据。方法 采集鼠类肺组织和血清标本，用间接免疫荧光试验检测鼠血清IgG抗体，直接免疫荧光试验检测鼠肺HV抗原。HV抗原阳性鼠肺接种Vero?E6细胞分离病毒，用HV单克隆荧光抗体鉴定分离株的型别。结果 共捕获鼠形动物1129只，其中黑线姬鼠为优势种，鼠肺HV抗原阳性率为3.0%，鼠血标本IgG抗体阳性57份，阳性率8.0%。分离到6株汉滩（HTN）型病毒，其中来自黑线姬鼠5株，褐家鼠1株。结论 浙江省存在以黑线姬鼠为主要传染源的HFRS疫源地，HV主要流行型别为HTN型。

【摘要】 目的 掌握浙江省肾综合征出血热（HFRS）流行特征，以制定有针对性的防治措施。方法 采用描述流行病学方法分析疫情， 实验室采用间接免疫荧光法检测HFRS患者血清中抗体， 直接免疫荧光法检测鼠肺汉坦病毒抗原。结果 2007年全省报告HFRS病例757例，主要分布在宁波、绍兴、台州、丽水、衢州等市，占全省发病总数的86.79%（657/757）。夏季和冬春季有2个发病高峰，青壮年农民病例居多。结论 浙江省HFRS疫情近年呈平稳趋势，但一些县（市）发病率居高不下，应加强重点地区防制工作。

目的 了解浙江省肾综合征出血热(HFRS)流行特点及汉坦病毒(HV)型别,为防治提供科学依据。方法 鼠肺HV抗原检测采用直接免疫荧光法(DFA),病毒分离采用阳性鼠肺研磨液接种幼龄长爪沙鼠,再经Vero-E6细胞传代,用单克隆抗体DFA鉴定毒株及分型。结果 从捕自浙江省龙泉地区的8份阳性鼠肺中分离到3株HV,经DFA鉴定均为汉滩型(Ⅰ型)病毒,3株病毒在Vero-E6细胞中的感染滴度为10 ^4.75～10M ^5.25CCID ₅₀/ml。结论 从鼠类肺组织中分离到3株汉滩型HV,毒株均能在Vero-E6细胞中较好增殖,有可能成为HFRS疫苗后备毒株。

目的从肾综合征出血热(HFRS)疫区阳性鼠肺中分离汉坦病毒(HV),并对分离到的病毒进行型别鉴定和生物学特性研究,为HFRS疫苗后备毒种库的建立打下基础。方法疫区阳性鼠肺研磨液接种长爪沙鼠分离病毒,并将分离到的HV经乳沙鼠脑内连续传代,采用直接免疫荧光法和酶联免疫吸附试验,检查毒株的型别,研究传代后毒株的繁殖特性、病毒滴度和抗原滴度。结果从疫区32份阳性鼠肺中分离到9株HV,经单克隆直接荧光血清检查6株为汉滩病毒株,3株为汉城病毒株,经乳沙鼠脑内连续传代,其中4株毒株的病毒滴度和抗原滴度较高,汉滩和汉城毒株的病毒和抗原滴度最高分别达10 ^6.50、10 ^6.00和1∶5120、1∶5120。结论4株毒株的病毒滴度和抗原滴度均较高,可作为HFRS疫苗后备毒种的筛选毒株。

目的观察汉坦病毒(HV)在Vero细胞上的适应能力和毒株在该细胞中的增殖规律。方法将HV感染Vero细胞,每隔3d收取细胞培养液,直到细胞衰老,并观察细胞的病变情况。采用间接免疫荧光法(IFAT)和反向被动血凝试验(RPHA),观察细胞培养液的病毒滴度和抗原滴度的动态变化。结果HV不致Vero细胞产生病变,病毒感染细胞第8～11天时细胞培养液的病毒滴度和抗原滴度最高,以后逐渐降低,但直到细胞感染病毒32d时其培养液的病毒滴度和抗原滴度仍稳定在5.00LgTCID ₅₀/ml和1∶20以上。结论两株病毒已适应于Vero细胞,且具有病毒滴度高、毒力强和抗原性良好的特性,是Vero细胞肾综合征出血热灭活疫苗良好的后备筛选毒株。